4、工艺流程：原料筛选；麦粒蒸煮调质；装袋装车；高压（1.5kg∕cm2）灭菌2.5小时；万级冷却室冷却；千级接种室百级层流罩接种（接种量1:15）；空调培养室控温培养。

①滤纸片保藏法取白色（收集深色的孢子）或黑色（收集浅色的孢子）滤纸，剪成4.0cm×0.8cm的小纸条，℃下高温灭菌30min。真菌孢子采用钩悬法收集。将载有孢子的滤纸条放入无菌试管中，用白胶塞封口，再将试管放入干燥器中1～2d，除去滤纸水分，最后低温保藏。保存期可达2～10年。转接培养时，将滤纸条取出，放在适宜的培养基上培养，即可培养出所需要的菌种。

　　②沙土管保藏法取河沙用蒸馏水浸泡洗涤数次，过60目筛除去粗粒，加1%稀盐酸煮沸30min，再用水冲洗至pH达到中性，烘干备用。同时，取非耕作层的土壤，用蒸馏水反复冲洗至pH中性，烘干碾细，过目筛，将处理好的沙、土按2～4∶1混匀，然后分装到小试管（0.5g每管），高压灭菌1h，待无菌检验合格后才可使用。将已形成孢子的斜面菌种，在无菌条件下注入无菌去离子水3mL，制成菌悬液，再用无菌吸管吸取菌液滴入砂土管中，以浸透砂土为止。将接种后的沙土管放入盛有干燥剂的真空干燥器直至沙土干燥。干燥的沙土管用无菌勺子捣松并每个菌种抽取1支接于斜面培养基上，进行培养，观察生长情况。检查无杂菌生长，则将制备好的沙土管用石蜡封口放入冰箱，在低温下可保藏2～10年。真空干燥操作须在孢子接入后48h内完成，以免孢子萌发。

“调质”是syivan菌种的关键技术环节，也有别于传统的瓶装麦粒菌种。调质指通过加水、加热、加料等各种手段对基质的理化性质进行调控，使其适合双孢菇菌丝的萌发生长，而对其他微生物与有一定的拮抗作用。双孢菇菌丝在基质中萌发生长常常因为各种因素的影响而面临其它微生物的竞争，调质良好的基质能使其在这种竞争中具有先天优势，从而保证竞争的成功率和产品的成品率。调质过程中的技术要点：主料（小麦）品种管理、麦粒基质含水量控制、麦粒基质表面理化性状调控和抗菌素添加。

　　1、主料选一级小麦：颗粒饱满，有小麦香味，新鲜无虫蛀，无霉变。每千粒小麦可见虫蛀破粒小于2，可见酶变粒小于1。虫蛀酶变小麦中的霉菌毒素对蘑菇菌丝萌发生产的负面影响巨大；

　　2、蒸煮后小麦的含水量控制在42%-45%；小麦在蒸煮过程中会吸收来自高压蒸汽和高压管路冷凝水，吸收量与气温有关；syivan建有气温和冷凝水变化对应数值表，可通过查询计算得出需要补充的水量。

　　3‘麦粒包衣：均匀添加0.3﹪石灰、2﹪石膏、4﹪轻质碳酸钙,与小麦共煮能使麦粒表面附着一层厚度适合的弱碱性包衣，其黏度、酸碱度等理化性质适合蘑菇菌丝生长，并对杂菌具有较强的拮抗力；

　　4、抑菌处理：均匀添加ppm苯併咪唑44号，农用硫酸链霉素ppm（干重浓度）能防治多种霉菌及细菌污染，且对蘑菇菌丝影响微弱。

　5、小麦调质蒸煮流程如下：A在蒸煮前根据生产要求制定蒸煮计划，确定蒸煮袋数主辅料数量；B根据气温查询小麦蒸煮吸水量；C计算补充加水量；D蒸煮操作想旋转蒸煮锅进主辅料，锁锅搅拌，开锅加水，锁锅，排冷气，升压蒸煮，保压闷煮，开锅出料，摊凉装袋，调质后的麦粒颗粒饱满，表面附着一层若碱性包衣。

经过调质的麦粒装袋，规格40×60cm装9-10公斤菌种/袋。菌袋带有专用透气贴膜；装袋后高压灭菌，冷却接种，恒温培养，培养期间要翻袋松粒一次使其快速走满菌丝。（注：美国syivan公司因其配套设施完善，没有我国装袋后再灭菌接种的过程，而是调质灭菌冷却接种在生产线里一次完成。）双胞菇透气大塑料袋栽培种以其培养周期短、菌龄一致、菌种纯度高、使用方便等优点将逐步取代传统的瓶装栽培种，但其生产工艺对技术与管理要求较高，小麦基质的调质是该工艺的基础与关键环节，工艺操作不到位极易造成大面积污染。国内目前只处在消化吸收阶段，大面积用于生产还需时日。今天刊出此文只为业界同仁对syivan大袋菌种多一份了解，相信今后通过各方的努力，我国也能做出类似的双孢菇菌种。

　　菌种的麦粒含水量45%是上限了，这和国内的麦粒种略有不同。通过和王戴两位老师的交流以及生产实践发现制作麦粒种的关键是选料，如果小麦虫蛀破粒和霉变程度较重，霉菌分泌的霉菌毒素会对双孢菇菌丝生长产生负面影响。此类小麦经调质高压灭菌霉菌虽能杀灭但霉菌毒素并未受破坏（高压灭菌保温℃左右，霉菌毒素的分解温℃是℃以上），由于霉菌毒素的存在会干扰菌丝的代谢，生长迟缓，如遇其他微生物的竞争就会造成大面积污染。国内麦粒种制作时加入一些发酵料或出菇废菌料，虽然可使蘑菇菌丝快速定植蔓延并对竞争微生物产生抑制，但菌种内的隐形污染很多，我想这可能是影响国产菌种优质性和稳定性的一个因素吧。

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